空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證--潔凈度的測(cè)定

驗(yàn)證通常是由安裝確認(rèn)（IQ）、運(yùn)行確認(rèn)（OQ）、性能確認(rèn)（PQ）組成的。其中儀器儀表的校準(zhǔn)可以歸屬于安裝確認(rèn)，也可以單獨(dú)成為一個(gè)組成部分，性能確認(rèn)是做后的判斷。在生產(chǎn)或工藝驗(yàn)證中，性能確認(rèn)是檢驗(yàn)該工藝過(guò)程的結(jié)果；在生產(chǎn)環(huán)境驗(yàn)證中，性能確認(rèn)是對(duì)空氣凈化系統(tǒng)是否能達(dá)到規(guī)定的潔凈度做出判斷，即合格還是不合格，因此性能確認(rèn)也就是常規(guī)意義上或狹義上的“驗(yàn)證”，也就是說(shuō)，平時(shí)所做的不包括安裝確認(rèn)及運(yùn)行確認(rèn)的驗(yàn)證實(shí)際上就是“性能確認(rèn)”。在空氣凈化系統(tǒng)驗(yàn)證中，為了不引起誤解，將性能確認(rèn)稱為“潔凈度測(cè)定”。醫(yī)藥工業(yè)潔凈室的潔凈度包括懸浮粒子和微生物兩個(gè)方面，因此潔凈度的測(cè)定主要進(jìn)行懸浮粒子和微生物的測(cè)定。
1、懸浮粒子測(cè)定
懸浮粒子的測(cè)定可參見(jiàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16292--2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測(cè)試方法》（以下簡(jiǎn)稱《粒子測(cè)試方法》），要點(diǎn)歸納如下：
（1）懸浮粒子的測(cè)定方法
主要有顯微鏡法及自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)法。
①顯微鏡法。顯微鏡法是用抽氣泵抽取潔凈室內(nèi)的空氣，把在測(cè)定用的濾膜表面上捕集到的粒徑中大于5um的粒子用顯微鏡計(jì)數(shù)的方法。用顯微鏡法測(cè)定的直徑為粒子的大直徑。
②自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)法。自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)法是把潔凈室中粒徑大于0.5um的粒子，按懸浮狀態(tài)連續(xù)計(jì)數(shù)的方法。在自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)法中規(guī)定懸浮粒子的粒徑等于標(biāo)準(zhǔn)粒子光散射量的球的相當(dāng)直徑。自動(dòng)粒子計(jì)數(shù)器為了保持其特性，需定期用聚苯乙烯膠乳進(jìn)行脈沖校準(zhǔn)及流量校準(zhǔn)。
（2）懸浮粒子潔凈度監(jiān)測(cè)
懸浮粒子潔凈度監(jiān)測(cè)的采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。一般對(duì)于高效過(guò)濾器裝在末端的空氣凈化系統(tǒng)及層流罩，只需在工作區(qū)（離地0.7～1m處）設(shè)置測(cè)點(diǎn)即可；而高效過(guò)濾器裝在空調(diào)器內(nèi)及末端為亞高效過(guò)濾器（效率≥95%）的空氣凈化系統(tǒng)，除在工作區(qū)設(shè)置測(cè)點(diǎn)外，還需在每個(gè)送風(fēng)口處（離開(kāi)風(fēng)口約0.3m）設(shè)置一個(gè)測(cè)點(diǎn)。
懸浮粒子潔凈度測(cè)定的小采樣量和少采樣點(diǎn)數(shù)目參見(jiàn)《粒子測(cè)試方法》的規(guī)定。
（3）懸浮粒子潔凈度級(jí)別的結(jié)果判定
結(jié)果評(píng)定參見(jiàn)《粒子測(cè)試方法》規(guī)定的兩個(gè)條件。需要說(shuō)明的是，《粒子測(cè)試方法》的標(biāo)準(zhǔn)未說(shuō)明是日常監(jiān)測(cè)還是驗(yàn)證。一般來(lái)說(shuō)，驗(yàn)證要求應(yīng)嚴(yán)一些，它是根據(jù)動(dòng)、靜比來(lái)確定合格標(biāo)準(zhǔn)的。測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)測(cè)試兩種。
①靜態(tài)測(cè)試是在潔凈室（或潔凈區(qū)）空氣凈化系統(tǒng)已處于正常運(yùn)行狀態(tài)，工藝設(shè)備已安裝，在潔凈室（或潔凈區(qū)）內(nèi)沒(méi)有生產(chǎn)人員的情況下進(jìn)行測(cè)試。
②動(dòng)態(tài)測(cè)試是在潔凈室（或潔凈區(qū)）已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)下進(jìn)行測(cè)試。
2、微生物測(cè)定
微生物測(cè)定的目的是確定浮游的生物微粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來(lái)判斷潔凈室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度。因此微生物測(cè)定有測(cè)定浮游菌和測(cè)定沉降菌兩種方法。
細(xì)菌通常肉眼看不見(jiàn)，可將它們采集或沉降到培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，由一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌繁殖而成的一細(xì)菌團(tuán)稱為菌落形成單元數(shù)（CFU），也稱菌落數(shù)。浮游菌用計(jì)數(shù)濃度表示（CFU/L或CFU/m3），沉降菌用沉降濃度表示［（CFU/（皿.min）］。
浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下近似公式：
Ng=NV_sFT
式中，Ng是在F面積上的細(xì)菌沉降數(shù)，CFU
    N是在空氣中的浮游菌濃度，CFU/cm³
    V_{s是含菌粒子沉降速度，cm/s
    F是沉降面積，}cm^{2
    T是沉降時(shí)間，s
（1）浮游菌的測(cè)定
浮游菌的測(cè)定可以參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16293-2010}《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法》（以下簡(jiǎn)稱《浮游菌測(cè)試方法》）。重點(diǎn)歸納如下：
①浮游菌測(cè)試是通過(guò)收集懸浮在空氣中的生物性微粒，通過(guò)專門的培養(yǎng)基，在適應(yīng)的生長(zhǎng)條件下，讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。
②浮游菌測(cè)定需有專門的采樣器、真空抽氣泵等設(shè)備，浮游菌采樣器常用撞擊法中的狹縫式采樣器。
③浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器，并嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書的要求定期進(jìn)行校驗(yàn)和操作。
④浮游菌測(cè)定的采樣點(diǎn)及數(shù)目與懸浮粒子測(cè)定相同，即在同懸粒子測(cè)定時(shí)相同的測(cè)定點(diǎn)采樣。
⑤浮游菌潔凈度測(cè)定的小采樣量和少采樣點(diǎn)數(shù)目參見(jiàn)《浮游菌測(cè)試方法》的規(guī)定。
⑥浮游菌潔凈度的結(jié)果評(píng)定參見(jiàn)《浮游菌測(cè)試方法》的規(guī)定。
（2）沉降菌的測(cè)定
沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的生物性微粒，加以培養(yǎng)繁殖后計(jì)數(shù)得到的。沉降菌的測(cè)定可參見(jiàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16294-2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中沉降菌的測(cè)試方法》（以下簡(jiǎn)稱《沉降菌測(cè)試方法》）。重點(diǎn)歸納如下：
①沉降菌測(cè)定的設(shè)備主要是90mm*150mm玻璃培養(yǎng)皿和各種培養(yǎng)基。
②沉降菌測(cè)定的培養(yǎng)皿應(yīng)布置在有代表性的地方和氣流擾動(dòng)小的地方，其少采樣點(diǎn)數(shù)目見(jiàn)下表：

在滿足少測(cè)點(diǎn)數(shù)的同時(shí)，還要滿足少培養(yǎng)皿數(shù)，如下表所示。不論面積大小、作為一個(gè)被測(cè)對(duì)象，都應(yīng)該滿足這個(gè)要求。

③采樣方法及培養(yǎng)。將培養(yǎng)皿按要求放置后，打開(kāi)平皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30min后，將平皿蓋蓋上，然后在30～35℃的條件下培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)。
④結(jié)果計(jì)算：M=ΣM_i/n
式中，M為平均菌落數(shù)，CFU
      M_i為1,2,3，…，n號(hào)平皿菌落數(shù)
      n為平皿總數(shù)
（3）物體表面微生物測(cè)試
此測(cè)試的目的是確定物體表面微生物污染的程度。一般有棉簽間接取樣后培養(yǎng)和直接接觸法取樣兩種測(cè)試方法。
接觸法使用羅達(dá)克培養(yǎng)皿，測(cè)試方法是將培養(yǎng)皿直接接觸需采樣的物體表面，培養(yǎng)后長(zhǎng)出菌落。這個(gè)測(cè)試技術(shù)適用于平整光滑的表面。
這項(xiàng)測(cè)試應(yīng)在去污染程序后進(jìn)行。但瓊脂培養(yǎng)基留在物體表面上終究是個(gè)問(wèn)題。因此，采樣后應(yīng)馬上進(jìn)行去污染。每只培養(yǎng)皿需做好標(biāo)志，指明采樣點(diǎn)的確切位置。應(yīng)注意房間里的標(biāo)志供現(xiàn)在和將來(lái)參考。